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干貝多糖的蛋白質脫除方式對抗氧化活性的影響(二)

2 結果與分析

2.1 干貝多糖蛋白質脫除的干貝結果

本實驗中,在多糖提取物不被顯著降解的多糖的蛋對抗的影條件下去除結合的蛋白質,以提高多糖的白質質量分數是十分必要的。1.3.1中得到的脫除DAMP的多糖質量分數為(53±0.58)%,蛋白質質量分數為(39.09±0.88)%。氧化經4種蛋白質脫除方式處理后,活性多糖質量分數、干貝蛋白質脫除率和多糖損失率見表1。多糖的蛋對抗的影多糖質量分數由高到低分別為:TCA法>稀堿法>堿酶酶解法>GDL法。白質其中,脫除TCA組多糖質量分數顯著高于其他3組。氧化蛋白質脫除率及多糖損失率由高至低依次為:TCA法>稀堿法>堿酶法>GDL法?;钚越Y合多糖質量分數、干貝蛋白脫除率與多糖損失率分析可得,多糖的蛋對抗的影TCA法脫蛋白質最有效,白質但多糖損失嚴重;DAMP經稀堿法與酶解法處理后,多糖質量分數無顯著差別,但稀堿組蛋白質脫除率及多糖損失率顯著高于酶解組;經GDL法處理后,多糖質量分數及蛋白質脫除率均顯著低于其他方式,多糖損失率也最少。

干貝多糖的蛋白質脫除方式對抗氧化活性的影響(二)

2.2 單糖組成分析

由表2可知,堿酶組多糖含有Man、GlcN、GalUA、Glc、Gal、Am;稀堿組多糖含有GlcN、Glc、Gal;TCA組多糖含有GlcN、GalUA、Glc;GDL組多糖含有Man、GlcN、Rha、GalUA、Glc。不同蛋白質脫除方式所得多糖的單糖組成略有差別,稀堿組和堿酶組多糖中的半乳糖醛酸在堿性環境中生成半乳糖,而TCA法和GDL法多糖中檢測到半乳糖醛酸,未檢測到半乳糖。各組數據中,葡萄糖質量分數均最高。據報道,海灣扇貝多糖組分為中性多糖和酸性多糖,與本實驗結果一致。

2.3 氨基酸組成分析

為了明確不同脫除方式處理的扇貝多糖中殘留蛋白質的情況,以及這些蛋白質與抗氧化活性之間的關系,對4種方式脫蛋白后的干貝多糖進行了氨基酸組成分析,結果顯示:干貝多糖中的總氨基酸質量分數為15~160mg/g,堿酶組和稀堿組均檢測山16種氨基酸,TCA組和GDL組均檢測出14種氨基酸,可見氨基酸種類齊全。由表4可知,堿酶組的親水氨基酸及極性氨基酸質量分數較高,非極性氨基酸及必需氨基酸質量分數較低,疏水性氨基酸質量分數最低;稀堿組的疏水氨基酸質量分數較低,其他4種氨基酸質量分數均最低;TCA組的疏水性氨基酸、非極性氨基酸與必需氨基酸質量分數最高,親水性氨基酸與極性氨基酸質量分數較低;GDL組的親水性氨基酸和極性氨基酸質量分數最高,疏水性氨基酸、非極性氨基和必需氨基酸質量分數較高。

2.4 剛果紅試驗分析

由圖1可知,在氫氧化鈉的濃度為0~0.1mol/L時,對照組(剛果紅)的最大吸收波長逐漸減小,GDL組和堿酶組多糖與剛果紅結合生成的絡合物的最大吸收波長隨NaOH濃度的增大紅移明顯發生,表明GDL組和堿酶組多糖存在三螺旋結構,TCA組和稀堿組多糖不具有三螺旋結構,可能是DAMP在堿液、酸液處理過程中,維持穩定三螺旋結構作用的分子內、分子間氫鍵受到破壞,導致三螺旋結構變性。

相關鏈接:氨基酸,多糖,氫氧化鈉半乳糖醛酸

 


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